Простейший препарат против эпидемии

В последние годы появляются все новые страшные разновидности вирусных инфекций, такие, как атипичная пневмония (SARS) и птичий грипп. Ученые постоянно ищут новые способы борьбы с этими вирусами, да и с обычным гриппом, который до сих пор не удается окончательно победить ни вакцинами, ни лекарствами.

Большинство новейших противовирусных препаратов оказываются слишком дорогими и малоэффективными. Поэтому специалисты все чаще обращают внимание на уже разработанные противовирусные препараты.

Один из них - российский препарат арбидол, исследования по изучению механизма действия которого были недавно проведены в лаборатории Всемирного центра ВОЗ по гриппу и был признан эффективным средством против вируса птичьего гриппа. Испытания, проведенные в нашей стране, показали эффективность препарата против атипичной пневмонии.

О том, как проходило изучение механизма противовирусного действия арбидола, рассказывает кандидат биологических наук, старший научный сотрудник Всероссийского научно-исследовательского химико-фармацевтического института (ВНИХФИ) Ирина Ленева.

- Арбидол хорошо известен в России. Он уже несколько лет применяется для лечения и профилактики гриппа. Почему понадобились дополнительные его испытания?
Действительно, арбидол широко и успешно применяется в России. Препарат был создан совместными усилиями ученых ВНИХФИ, НИИ медицинской радиологии РАМН в Обнинске и ленинградского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера. Лечебная активность арбидола объясняется его комплексным действием. Стимулируя выработку в организме интерферона, он помогает бороться с самыми различными вирусами. Будучи иммуномодулятором, арбидол регулирует работу иммунной системы. Плюс ко всему, у него есть антиоксидантное, а главное - прямое вирусоспецифическое действие.

Первые три действия арбидола были изучены достаточно основательно, а вот расшифровать механизм его противовирусной активности в России мы не могли, хотя само вирусоспецифическое действие арбидола сомнений у нас не вызывало. Естественно, этот пробел в исследованиях мешал признанию препарата на мировом уровне.

Для доказательства наличия у препарата вирусоспецифического действия необходимо определить так называемые мишени - структуры вируса, на которые препарат действует при внедрении вируса в организм и его размножении. Такие исследования очень сложны, и они могут проводиться только в нескольких лабораториях в мире.

Поскольку сделать это в России мы не могли, мы обратились к профессору Алану Хею, возглавляющему Всемирный центр ВОЗ по гриппу в Лондоне. Мы предложили изучить арбидол в его центре, используя научные подходы и оборудование английских исследователей. Алан Хей заинтересовался препаратом.

- Некоторое время назад появлялись сообщения о создании новых эффективных препаратов против гриппа. Почему же заинтересовались именно российским препаратом?
Дело в том, что во всём мире набор противовирусных препаратов для лечения гриппа не очень велик, и они не лишены недостатков.

Существует два поколения препаратов против вируса гриппа. Первое поколение представлено римантадином (это хорошо нам известный препарат ремантадин) и амантадином, который у нас из-за токсичности не используется. Эти лекарства активны только против вируса гриппа типа А.

К препаратам второго поколения относятся так называемые ингибиторы нейраминидазы. Это спрей занамивир и таблетки осельтамивир. Оба препарата активны против вирусов гриппа типа А и В. Но, к сожалению, у ряда людей занамивир, применяемый в виде ингаляций, нередко вызывает раздражение в носоглотке и бронхах, а осельтамивир - тошноту и рвоту.

Да и стоимость этих лекарств очень высока - лишь на один курс лечения ими придется потратить 50-80 долларов. Поэтому поиск новых лекарств очень актуален.

- Но ведь ВОЗ основным средством профилактики гриппа считает вакцинацию?
Это так, но есть несколько причин, делающих противовирусные препараты необходимыми. Во-первых, всегда существует возможность неточного прогноза вакцины - специалисты могут "промахнуться", выбирая ее антигенный состав. Во-вторых, вакцина не дает стопроцентной защиты, и в случае заболевания грипп надо лечить противовирусными препаратами. А в-третьих, особую тревогу специалистов вызывает возникновение в результате мутаций новых особо патогенных штаммов вируса гриппа, способных вызвать пандемию. Примером этого может служить так называемый птичий грипп. Для создания вакцины против такого нового штамма необходимо не менее 6 месяцев. А это непозволительно долгий срок в такой опасной ситуации.

- Расскажите, как проходили ваши исследования.
Во время исследований в лаборатории Всемирного центра ВОЗ по гриппу мы в первую очередь попытались определить мишени, на которые действует арбидол.

Чтобы понять суть этих исследований, нужно понимать, как происходит репродукция вируса. В этом процессе выделяют ранние и поздние стадии. Сначала вирус "приклеивается" к поверхности клетки, и лишь потом проникает внутрь ее. Там он оказывается внутри так называемой эндосомы - образования, которое можно сравнить с пузырьком, отграниченным от самой клетки мембраной. Внутри эндосомы повышенное значение рН, и это индуцирует конформационные изменения вирусного белка гемагглютинина (ГА), расположенного на поверхности вируса.

Конформационные изменения ГА делают его способным вызывать слияние оболочки вируса с мембраной эндосомы. В результате этого освобождается расположенный внутри вируса геном, в котором записана вся программа для создания новых вирусов.

С этого момента начинаются так называемые поздние стадии репродукции вируса, в процессе которых с генома считывается генетическая информация, синтезируются вирусные белки, а затем начинается сборка новых вирусов.

Исследования показали, что арбидол действует на ранней стадии репродукции, препятствуя слиянию оболочки вируса с оболочкой эндосом. Этот процесс происходит внутри клетки, и далее нам нужно было детально понять, как арбидол это делает. Изучение этого процесса было проведено с применением полученных нами мутантов, устойчивых (резистентных) к арбидолу. Оказалось, что "мишенью" для арбидола является гемагглютинин вируса.

- Странно, ведь наличие вирусов, резистентных к арбидолу, означает, что на них это лекарство действовать не будет?
Это обратная сторона эффективности лекарства. Она свидетельствует о том, что подавляющая часть вирусов погибает, и выживают лишь некоторые. И это обязательный критерий, доказывающий наличие противовирусного действия лекарства.

Сначала получить такие резистентные вирусы нам не удавалось. Но потом, когда мы стали заражать вирусом гриппа культуру клеток в присутствии арбидола многократно, после пятнадцатого пассажа мы их получили. Для сравнения: при использовании римантадина вирусы-мутанты образуются достаточно быстро, после 2-3 пассажей. Это значит, что вероятность появления вирусов гриппа, устойчивых к арбидолу в природе и циркулирующих среди людей, очень невысока. А вот вирусы, резистентные к римантадину, уже встречаются не только в лабораторных условиях, но и среди пациентов.

Таким образом, благодаря выделению в лаборатории вирусов, устойчивых к арбидолу, было окончательно доказано его прямое противовирусное действие. И сделано это было согласно самым строгим международным правилам.

- Как удалось установить активность арбидола против вируса птичьего гриппа?
Вирус птичьего гриппа Н5N1 впервые выявили у человека в 1997 году в Гонконге. Тогда из 18 больных погибли 6 человек. Через год там же выявили другой штамм вируса H9N2, а в конце 2003 - начале 2004 года сразу в нескольких азиатских странах были зафиксированы новые вспышки птичьего гриппа, снова вызванные вирусом Н5N1. Было зафиксировано несколько смертельных исходов - летальность при птичьем гриппе весьма высока.

До этого ученые считали, что для человека птичий грипп не опасен. И лишь Роберт Уэбстер, заведующий отделением вирусологии и молекулярной биологии Детского лечебного центра Св. Иуды в Мемфисе (штат Теннеси, США), утверждал, что возбудитель птичьего гриппа может быть опасен и для человека. Он разработал теорию, согласно которой птичий грипп может передаваться и человеку. Большинство же ученых полагало, что мы можем заражаться вирусами гриппа только от свиней. Считается, что испанку, унесшую миллионы человеческих жизней, вызывал вирус свиного гриппа.

Роберт Уэбстер работал в Гонконге во время вспышки, и у него в лаборатории есть вирус птичьего гриппа, привезенный оттуда. Это большая редкость, мало лабораторий, в которых есть этот опасный возбудитель. Мне посчастливилось работать у профессора Уэбстера. Когда я рассказала ему об арбидоле, он проявил к нему интерес. Оказалось, что препарат ингибирует размножение вируса птичьего гриппа. Одним словом, это лекарство очень перспективно.

- Получит ли арбидол международное признание?
Это очень сложный вопрос. Система регистрации лекарств на Западе очень жесткая и бюрократизированная. Но известен прецедент, когда Всемирная организация здравоохранения уже признавала наш противовирусный препарат. Им оказался римантадин, и это было еще в советские годы. У этого препарата сложная история. Римантадин открыли американцы, но почему-то забросили его исследования.

Римантадин стали изучать и применять в СССР. Препарат стал популярным. Спустя некоторое время ВОЗ признала его как эффективное средство против гриппа, а Советский Союз был признан своеобразным полигоном, на котором было испытано это лекарство.

Ситуация с арбидолом во многом схожа. Масштабы применения арбидола в России сравнимы с использованием римантадина, а исследования, доказывающие его противовирусную активность, проведены на самом высоком уровне. Но как будут развиваться события дальше, не может предсказать никто. Одно можно утверждать точно: мы пробудили интерес к арбидолу, и на Западе этот препарат уже знают.